《与君无别离》的剧情如下：
周梨原本是现代的法医学专业研究生，她意外穿越进了一本重生大男主复仇文中，成为了书中重生主角君无烨追杀的反派大BOSS姜若离。刚穿越过来，周梨便险些命丧君无烨剑下，血洒当场，开篇就将紧张感拉满。
为了保住小命回到现代，周梨对外“扮老虎吃猪”，努力维持反派圣女姜若离的人设。而君无烨表面深沉多疑，实则嘴硬心软、傲娇可爱，重生后一心想要复仇。
君无烨冒险带姜若离去望月宫求解药，姜若离挡在他身前镇住局面。为解雪鬼蛊毒，君无烨甘愿成为冰蚕蛊的宿主，浸在冰雪中忍受痛苦。姜若离昏迷苏醒后担心他，而君无烨强撑身体假装正常，实则吐血。
君无烨成功养成冰蚕蛊并治好了姜若离的蛊毒，却无意中听到白墨染与姜若离的对话，得知洛秋寒是被姜若离所杀并制成雪魅，他震惊不已决定报仇，白墨染则打算灭口，关键时刻姜若离为保护君无烨，两人一起掉下悬崖，君无烨的冰蚕蛊发作，姜若离用自己的鲜血为饵将蛊引出。
在第6集中，君无烨和师兄宋清和商定去查望月宫，姜若离包扎完被雪魅抓伤的手臂，君无烨悄悄看望她时正逢莫怀忧前来，姜若离不得不与莫怀忧虚与委蛇，这让君无烨吃醋。姜若离因雪魅爪子有毒晕倒。
第7集中，君无烨带姜若离去望月宫，为求解药孤身对抗望月宫，姜若离用尽最后的力气挡在他身前，利用不夜天圣女的身份镇住局面。望月宫宫主白墨染表示，要解雪鬼蛊毒，必须用冰蚕蛊以毒攻毒，而冰蚕蛊需要活人血肉饲养，君无烨甘愿成为宿主，浸在冰雪中忍受吸血食髓的痛苦，姜若离昏迷苏醒后担心他，君无烨强撑身体假装一切正常，在姜若离看不见的地方吐了大口的血。
第8集中，君无烨成功养成冰蚕蛊，并治好了姜若离的蛊毒。然而，他无意中听到了白墨染与姜若离之间的对话。白墨染质问姜若离为何会中了雪魅蛊，因为洛秋寒明明是被她所杀并制成了雪魅。这一消息让君无烨震惊不已，姜若离也对自己的行为感到困惑。白墨染怀疑姜若离是在演苦肉计，认为她让君无烨杀了雪魅是为了制造更强的雪魅。君无烨决定找姜若离报仇，而白墨染则打算灭口。关键时刻，姜若离为了保护君无烨，两人一起掉下了悬崖。君无烨的冰蚕蛊发作，姜若离为了救他，用自己的鲜血为饵，通过唇舌的气息将蛊引了出来。
第18集中，甘蒲潜伏刺杀隐娘，导致隐娘重伤昏迷。在见到韩忠后，甘蒲得知明夷山庄并没有灭墨门，而是被王权利用诬陷。甘蒲因刺杀隐娘而被软禁，清采不愿离开她，在门外日夜陪伴，两人的感情更加深厚，甘蒲也意识到真正的敌人是王权。
第19集中，看守甘蒲的守卫被两人真挚的感情打动，放清采进到禁闭室，许久未见的两人紧紧拥抱。此时红袖带来噩耗，告知大家隐娘治疗后不幸去世。王逸少也带来了王权的消息，称王权要在山庄策划演出，意图将众人一网打尽，并且还要灭掉明夷山庄。得知隐娘创建山庄的目的是保护无家可归的女子后，甘蒲终于意识到真正的敌人是王权。
第20集中，大战即将来临之际，清采为了帮助甘蒲弥补亲情缺失的遗憾，承诺成为她的“母亲”。她带甘蒲去了阿晶家学习做菜，并一同上街观察其他母女之间的互动。甘蒲感到非常开心和满足，露出了前所未有的笑容。然而，他们意外遇到了王权派来的神秘杀手丁老邪和丁老怪一行人。幸好对方尚未发现清采的真实身份，两人得以安全离开。与此同时，回王城汇报情况的韩艾真担心清采的安全，急忙赶往小镇与师父狂道人会合。
周梨对内忍辱负重，利用自己在现代所学的法医学知识，协助君无烨调查其生母之死的真相。在这一过程中，两人从欢喜冤家、互相防备，逐渐发展到患难见真情、生死与共。经过一系列的经历，两人最终交换真心，完成了彼此的救赎。并且在调查案件的过程中，不断经历剧情反转，故事层次丰富，让观众一路甜爽到底。
