毒气室是纳粹进行大规模屠杀的工具，始于1939年12月，当时党卫军的一支特遣队用一氧化碳毒死了波兰的精神病人。一个月后，安乐死计划的头目决定利用一氧化碳杀死由他管制的人，如残疾人、慢性病患者、老年人等等。之后纳粹找到了一种叫齐克隆b的商业用途的杀虫剂，这是一种氰化氢，可以更有效达到目标。

人们在进入毒气室之前他们的财物和衣服被剥夺、头发被剪掉；然后被推进毒气室，双手高举，这样可以尽可能多地塞人进去；婴儿和儿童则被扔到人群头顶上。受害者遭毒杀后，特遣队成员会将尸体从毒气室搬出和掩埋。

其中最出名的当属奥斯威辛集中营，齐克隆 b首次在奥斯威辛灭绝中心投入使用，在奥斯威辛存在了4年间有100多万人被毒死。

但纳粹对灭绝速度仍不满意。1942年夏，纳粹出台计划，打算建造新一代效率更高的毒气室和处理尸体的焚尸炉。他们建造了三座配有大型固定毒气室的灭绝营。贝乌热茨灭绝营于3月开始运行，配有三间毒气室，位于一座木板房中；索比堡灭绝营的屠杀始于5月，其毒气室设在一座砖制建筑中；特雷布林卡灭绝营建于7月，有三间可以密封的毒气室。这三座灭绝营里每座都有成千上万的犹太人被柴油机排出的废气毒死。

其它一些纳粹营地也有毒气室，但没有定期用来进行大规模灭绝。毛特豪森、诺因加默、 萨克森豪森、斯图霍夫和拉文斯布吕克也有毒气室。这些毒气室都用齐克隆 b杀人。

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